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抗小分子免疫复合物类抗体发现

Although competitive immunoassays are currently used more commonly to detect small molecules due to their
low molecular weight and single epitope, noncompetitive immunoassays have better specificity, 

higher sensitivity and broader linear ranges. 

抗小分子免疫复合物抗体开发


免疫分析有竞争与非竞争两种基本形式,应用于小分子检测的主要是竞争分析形式,非竞争型免疫分析理论上比竞争型具有更高的灵敏度与线性范围,被分析物的含量与检测信号在竞争免疫分析中呈负相关,而在非竞争型免疫分析中呈正相关。图1直观地说明非竞争型免疫分析在检测灵敏度方面的优越性。


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图1  非竞争型分析和竞争型分析灵敏度的对比

Fig.1   The different sensitivities between competitive immunoassay and noncompetitive immunoassay


小分子由于分子量小(<1000Da),表位单一,很难实现非竞争免疫分析,如何才能实现非竞争免疫分析呢?研究者发现一类称为抗异型抗体(anti-metetype antibody),这类抗体可以识别小分子与抗体结合形成的新表位。


当小分子与抗体结合后,大于85%的抗原可接近表面积被包埋,只有极小部分与抗体形成异型表位,因而制备异型抗体特别困难。小分子抗体一般来源于鼠单抗,如果再将鼠抗复合物免疫小鼠,基本不会产生免疫应答。常规需要将鼠抗复合物免疫兔子,但是兔单抗的开发无论是杂交瘤,噬菌体展示还是single B,都面临着效率低的问题。


阿帕克生物基于HTS-Smart Select 平台,通过免疫小分子复合物抗体,让动物产生抗异型抗体,再构建酵母展示文库,通过流式分析,直接分选抗异型抗体,整个过程能够精细控制筛选流程,高效筛选高亲和力,高特异抗体。



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